(资料图)

1、如何设置梯度

温度梯度pcr一般主要是指退火温度梯度。如果PCR仪支持的话，一次可以做好几个温度梯度，象AIB的可以做六个，而有些公司的是模仿梯度，比如一边高一边低，这样梯度温度可能误差大一点。如果仪器不支持，可能就麻烦了，想做六个温度就得做六次PCR了。每一次设成不同的温度。

2、如何设置梯度pcr

建议最少5个（稀释10倍），最多不超过8个梯度（稀释5倍）每个梯度至少三个平行样。

3、梯度怎么设置最佳

aluckydog9258(站内联系TA)一般来说设置等间距的五个浓度点，以被测物物质的浓度居中为佳hao1658(站内联系TA)一般来说设置等间距的五个浓度点，以被测物物质的浓度居中为佳chen_007051(站内联系TA)也可以配单浓度，控制进样量，做峰面积和纯品质量的标曲yangliu2006(站内联系TA)设置六个浓度：20%，50%，80%，100%（检测样品的浓度），120%，150%；以样品峰面积对浓度做标准曲线aluckydog9258(站内联系TA)Originally posted by chen_007051 at 2010-03-21 23:43:15:

是啊，是验证在哪些浓度范围内线性关系是符合要求的，仅仅控制进样体积，同一份标液进样1ml，2ml，3ml，4ml，5ml，绝的线性啊，还用得着验证吗？ 当然，你要保证你的出峰面积在你的范围内，不一定非得要浓度是吗rachel2975(站内联系TA)等差设置5个浓度点，浓度应覆盖所有样品含量，且最高浓度是最低浓度的10倍以上。mengxiangpp(站内联系TA)一般设定5-6个浓度梯度，需要测定样品的浓度点，设在5-6个浓度点的中间。

一般设定5-6个浓度梯度，需要测定样品的浓度点，设在5-6个浓度点的中间。

一般设定5-6个浓度梯度，需要测定样品的浓度点，设在5-6个浓度点的中间。

在做标准曲线前是要做预实验的。

1、样品是有标示量的吧，先按标示量，稀释成一定浓度进样，根据峰面积的大小，调整稀释样品的倍数，反复试验找到适宜的稀释倍数后，以此浓度点为线性的中间点，向两边延伸。

2、过载了可以再稀释样品到适宜的浓度；

3、如果样品的浓度低于检测限，一种是这种检测方法需要重新考虑，第二种可能是你样品进样前，稀释的倍数过大。